1微升血清20分钟内“识别”6种癌症
癌症的出现总是“悄没声息”,当真正被大夫确诊时,亦许病人早已病入膏肓。倘若简单验个血就能解密癌症的“个性特点”,早点将癌症扼杀在萌芽之中,那该有多好!
日前,中科院国家纳米中心科研员孙佳姝团队构建了一套高“性价比”的癌症筛查办法:只需1微升血清(一般采血管采血量的1/5000),经过对其中细胞外囊泡的检测,就可在20分钟内对6种癌症进行初期筛查,同期亦能较为准确地对癌症进行归类。
近年来,科研发掘血液及其他体液中含有癌症源自的物质,能够实现疾患的分子鉴定,有助于初期诊断、准确预测、个性化治疗以及疾患监测,这些物质重点包含循环肿瘤细胞(CTCs),肿瘤细胞外囊泡(EVs),循环肿瘤DNA等。
它们特指从原发肿瘤细胞脱落进入外周血液循环的生物标志物。
这种检测办法被叫作为肿瘤液体活检技术。该技术不仅能够用于某些类型实体肿瘤的初期诊断,况且能够监测肿瘤复发,评定疗效,拥有标本易得到、创伤性小、非侵入性、可反复采集等优良。
做为液体活检标志物中的“后起之秀”,“肿瘤细胞外囊泡”是肿瘤细胞分泌到胞外环境的拥有膜结构的囊泡,直径在30-1000 nm之间。
癌细胞与正常细胞所分泌的EV呈现出不同膜蛋白特征,而这些特征差异就能够用于癌症的筛查与诊断。相较于循环肿瘤细胞和循环肿瘤DNA来讲,肿瘤细胞外囊泡有着很大的优良,例如在血液中的含量丰富,其分析不必须采集海量血液。另外由于膜结构的守护,外泌体膜蛋白在长时间冷存的血液中依然能够被分离和检测出来。
然而,理想很饱满,现实很骨感。
将EV分析检测广泛应用于临床并不易。过去的临床应用中,操作者必须长期的超速离心从血液中提取EV,不仅如此,还容易受到共沉淀的杂蛋白影响。而后续膜蛋白分析手段,如酶联免疫吸附实验、蛋白免疫印迹和质谱等,过程繁杂繁琐,成本高耗时长,且必须专业技术人员操作。
怎样在高背景血清或血液样本中分离提取尺寸较小的EVs,怎样加强EVs检测办法的灵敏度,是现有EVs肿瘤液体活检技术面临的重大挑战。此刻迫切必须一种更加简单、快速、低价的EV分析检测手段。
而经过近十年的技术累积,此刻最终成功实现了从技术平台向癌症筛查的成功转型。
科研人员首要利用荧光标记的核酸适体特异性识别EVs表面肿瘤关联膜蛋白,亦便是在肿瘤细胞上打上“烙印”;接着,科研人员运用了“热泳”技术,经过激光照射微流控芯片后,产生温度梯度,诱导30-1000 nm的EVs快速汇聚至芯片中央,可富集1400倍,而游离的核酸适体或蛋白仍保持分散状态。EVs汇聚后,运用荧光显微镜读取结合在EVs上的核酸适体信号,从而得到EVs膜蛋白组学信息。
最后,科研人员取60份癌症病人与10份健康对照的血清样本,对每份样本进行7种抗原体多靶标检测,用检测结果训练设备学习算法,发掘灵敏度与特异性都接近100%。
利用极少量样本实现初期癌症灵敏度高检测(I期95%),并首次经过EVs进行癌症归类。不久的将来,这有望作为体检或医院常规的癌症筛查手段,大夫只必须取出某种体液(例如血液),并对其中的EVs进行分析就可,以对病人导致更小创伤的方式,对疾患做出诊断。
|